婷婷久久香蕉五月综合加勒比,少妇脱了内裤让我添,人妻用嘴含精大口吞精,亚洲 欧美 综合 另类 中字

歡迎來到上海仁捷生物科技有限公司網(wǎng)站!
技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)elisa試劑盒操作方法:

大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)elisa試劑盒操作方法:

發(fā)布時(shí)間:2017-03-16   點(diǎn)擊次數(shù):2069次


?本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)的含量。
?有效期:6個(gè)月
?保存條件:2-8℃
?本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

 

實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
樣本處理及要求
1.  血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

需要而未提供的試劑和器材
1.酶標(biāo)儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
4.蒸餾水或去離子水

試劑盒組成
名稱    96孔配置    48孔配置    備注
微孔酶標(biāo)板    8孔×12條    8孔×6條    無
標(biāo)準(zhǔn)品    0.3mL*6管    0.3mL*6管    無
樣本稀釋液    6mL    3mL    無
檢測抗體-HRP    10mL    5mL    無
20×洗滌緩沖液    25mL    15mL    按說明書進(jìn)行稀釋
底物A    6mL    3mL    無
底物B    6mL    3mL    無
終止液    6mL    3mL    無
封板膜    2張    2張    無
說明書    1份    1份    無
自封袋    1個(gè)    1個(gè)    無
備注:
1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 pg/mL
2.  經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)
1.嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2.洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4.底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5.避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
6.在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9.不能使用過期產(chǎn)品。
10.如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

操作步驟
1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.  樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。

試劑盒性能
1. 檢測范圍:1.25 pg/mL – 40 pg/mL。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

說明
1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。
2.zui終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。
3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時(shí)間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,電子版說明書僅作參考。
4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說明才會(huì)得到*的檢測結(jié)果。

大内密探之零零性性| 狠狠色噜噜狠狠狠777米奇小说| 外国四个黑人RAPPER组合| 成人H动漫精品一区二区| 成人精品一区二区三区不卡免费看| 久久久久亚洲AV片无码下载蜜桃| 天天躁恨恨躁夜躁2020| 一本一道久久A久久精品综合| 免费观看全黄做爰| 无码国产激情在线观看| 亚洲AV天堂一区二区香蕉| 国产人妻大战黑人20P| 欧美性猛交XXXXX按摩欧美| 精品乱码一区二区三四区视频| 狠狠综合久久AV一区二区| 国产69精品麻豆久久久久| 日本无码色情影片在线看| 国产午夜片无码区在线播放| 国产精品国产三级国产普通话| 国产成A人片在线观看视频下载| 亚洲午夜无码AV毛片久久| 精品国产A∨无码一区二区三区| 亚洲精品99久久久久中文字幕| 老少做爰XXXXHD老少配| 老师穿着旗袍肉色丝袜让我玩| 孰妇XXXXXX的性生话| 无码人妻精品一区二区三区蜜臀| 白雪被出租车司机强好爽| 无码办公室丝袜OL中文字幕| 精品人妻无码AV一区二区| 我趁老师睡觉摸她奶脱她内裤| 娇妻借朋友高H繁交H| 久久久99精品免费观看| 被调教的少妇雅芳1一19| 亚洲AV无码专区国产乱码电影| 再深一点灬流出白色液体| 国产成人无码精品久久久免费| 狠狠噜天天噜日日噜| 日本亲与子乱人妻HD| 国产精品免费精品自在线观看| 妺妺窝人体色777777野大粗|