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植物elisa試劑盒在技術(shù)上有哪幾個關(guān)鍵點?

發(fā)布時間:2022-12-23   點擊次數(shù):954次
  植物ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在植物學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。
 
  植物ELISA試劑盒實驗原理:
  試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被植物白介素1α(IL-1α)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物白介素1α(IL-1α)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
 
  優(yōu)勢:  
  1、進口抗體:高效、靈敏、特異; 
  2、規(guī)范包被操作:吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高;
  3、先進的優(yōu)化方案:回收利用率高 可靠性強;
  4、適用于體液 組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本;
  5、可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等X。
 
  植物ELISA試劑盒技術(shù)關(guān)鍵:
  1、細(xì)胞上清:前處理有必要把細(xì)胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時,用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋;
  2、腦脊液:前處理有必要把細(xì)胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時,用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋;
  3、血清血漿:請參與50ul樣本分析緩沖液后加50ul標(biāo)本,如稀釋量大,請將樣本與樣本分析緩沖液等量參與,缺少部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液賠償至100ul;
  4、組織勻漿液的樣本,要制備過程中需要在緩沖液中參與蛋白酶抑制劑,防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解,構(gòu)成查看效果的值偏低。
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